Děláme také PCR experimenty, proč jsou výsledky vždy o tolik horší než ostatní?

Děláme také PCR experimenty, proč jsou výsledky vždy o tolik horší než ostatní?

V laboratoři se podívejte na PCR jiných lidí, účinnost amplifikace je vysoká, elektroforézní proužek perfektní, a podívejte se na jejich vlastní, těžko proveditelné po dlouhou dobu, cítíte, že reakce je velmi dobrá, výsledek falešně pozitivního testu…… Co je problém?

Věřím, že i řada našich partnerů se setkala s různými problémy.Když v PCR experimentech narazíme na zeď, budeme podvědomě analyzovat faktory v reakčním systému, ale často ignorujeme důležitý vliv spotřebního materiálu v experimentech.

Váš výsledek PCR je špatný, hlavním důvodem může být spotřební materiál PCR.Na jedné straně mikrokontaminace spotřebního materiálu nebo zavedení inhibitorů způsobí experimentální znečištění;Na druhou stranu nevhodný výběr spotřebního materiálu utrpí také výsledky experimentu.

Problém přichází znovu.Existuje mnoho typů spotřebního materiálu pro PCR, jak tedy vybrat ten správný, aby byl experiment plynulejší?Jakým problémům je třeba věnovat pozornost?Nebojte se, dnesI v kombinaci s mnohaletými zkušenostmi při řešení běžných problémů s výběrem spotřebního materiálu pro PCR vám doufám pomohu.

 

Q1: Proč je spotřební materiál PCR obvykle vyroben z materiálu PP?

Huida: Protože dodávky PCR jsou obvykle v přímém kontaktu s činidly nebo vzorky, polypropylenové (PP) materiály jsou biologicky inertní, neulpívají na biomolekulách a mají dobrou chemickou toleranci a teplotní toleranci (lze autoklávovat při 121° C, snese i změny teploty během tepelného cyklu).

 

Q2: Jak si mám vybrat mezi různými velikostmi PCR zkumavek/destičky?

HUIDA: Účel výběru: vybrat správné produkty podle konkrétních experimentálních požadavků.Většina velikosti PCR zkumavky může splňovat požadavky PCR reakce.Na tomto základě se doporučuje nejprve zvolit nízkoobjemovou trubici.Protože nízkoobjemová reakční trubice/deska má malý prostor nad hlavou, zlepšuje se tepelná vodivost a snižuje se odpařování.Zároveň je nutné se vyvarovat přidávání příliš velkého nebo malého množství vzorků.Příliš mnoho může vést ke snížení tepelné vodivosti, rozlití a křížové kontaminaci, zatímco příliš málo může vést ke ztrátě vzorku odpařováním.

Specifikace a objemy běžných reakčních zkumavek:

Jednoduchá/kombinovaná tuba: 0,5 ml, 0,2 ml, 0,15 ml

96-jamková destička: 0,2 ml, 0,15 ml

384-jamková destička: 0,04 ml

 

Q3: Když je množství vzorku malé, vyberu si jednu trubku nebo kombinovanou trubku, ale proč některé mají plochý kryt a některé mají konvexní kryt?

Huida: Pokud je množství vzorku malé, bude preferována jedna zkumavka nebo kombinovaná zkumavka.Pokud je však reakční objem velký, dominuje jedna zkumavka a objem může dosáhnout 0,5 ml.A plochý kryt a konvexní kryt má každý výhodu, konkrétní může odkazovat na následující informace.

Jedna tuba: 0,2 ml a 0,5 ml;Lze flexibilně zvolit množství vzorku.

Spojovací trubice: 0,2 ml nebo 0,15 ml je volitelná;Běžných je 8 nebo 12 trubek.

Plochý kryt: může zajistit přesný přenos fluorescenčního signálu pro qPCR;Snadné psaní značek.

Konvexní kryt: kontakt s horkým krytem přístroje PCR pro snížení deformace reakční zkumavky způsobené tlakem;Bude však ovlivňovat přenos fluorescenčního signálu a nelze jej použít pro experiment qPCR.

 

Q4: Proč mají některé PCR destičky obruby a některé ne?

Huida: Ve skutečnosti je plášť PCR destičky navržen tak, aby se lépe přizpůsobil automatizačním aplikacím, poskytoval stabilní podporu a mechanickou odolnost nástroje a také vyšší stabilitu během procesu pipetování.

PCR destičky se obecně dělí na nelemové, poloviční a plné.

BezDestička: Vhodné pro většinu strojů PCR nebo qPCR, ale ne pro automatizační aplikace.Stabilita v procesu pipetování není vysoká, takže je třeba jej používat s podpěrou destičky.

Deska s polovičním okrajem: lze přizpůsobit aplikaci štítků nebo čárových kódů a automatické aplikaci a má dobrou stabilitu při pipetování.

Plná okrajová deska: velmi vhodná pro automatizované experimentální aplikace, lze ji také přizpůsobit etiketě a aplikaci čárového kódu.Má dobrou mechanickou pevnost, lze jej použít v nástroji PCR s vybouleným modulem a má vysokou stabilitu v procesu pipetování.

 

Q5 :Proč u destiček PCR nejsou rohy a štítky úplně stejné?

Huida: Záleží na efektu rohového řezání a značení.

Rohové řezání: Volba polohy rohového řezání PCR destičky závisí na požadavcích vhodného nástroje pro snadné umístění.

Identifikace: Alfanumerické markery na PCR destičkách pomáhají identifikovat jednotlivé jamky a umístění vzorků.Obecně pro reliéfní barevné digitální logo nebo gravírované logo.Pro některé automatizované aplikace jsou potištěné a označené reakční destičky lépe utěsněny.

 

Q6: Proč jsou některé PCR destičky konvexní, zatímco jiné jsou ploché?Který je lepší?

Huida: Co sedí, je nejlepší.Existují dva druhy běžných PCR destiček: plochý okraj pórů a vysoký okraj pórů.

Reakční destička s plochým okrajem, vhodná pro většinu přístrojů PCR.

Reakční desky se stoupajícími okraji otvoru usnadňují utěsnění membrány a snižují riziko křížové kontaminace mezi vzorky.

 

Huida má dlouholeté zkušenosti s výrobou a zpracováním produktů PCR a vysokými průmyslovými standardy.Produktová řada je bohatá a dokáže vyhovět velké většině experimentálních aplikací PCR.Přijďte si vybrat ty správné produkty pro své experimentální aplikace.

谷歌推广疫情产品PCR


Čas odeslání: 03.06.2021

Pošlete nám svou zprávu:

Zde napište svou zprávu a pošlete nám ji